Методы исследования сосудисто – тромбоцитарного гемостаза
Определение количества тромбоцитов
Состав набора:
адреналин; растворитель для адреналина, 8,5 мл – во флаконе.
Оборудование, материалы, реагенты:
пипетки вместимостью 0,05 – 2,0 мл; физиологический (0,9%) раствор хлорида натрия.
Приготовление анализируемых образцов: венозную
кровь центрифугируют при 1000 об/мин (240 g) в течение 7 мин. Богатую тромбоцитами плазму переносят в другую пробирку и повторно центрифугируют при 3000 об/мин (1200g) в течение 15 мин., в результате получают бедную тромбоцитами плазму.
Разведение адреналина:
во флакон с адреналином внести 8,0 мл растворителя для адреналина и развести содержимое при комнатной температуре путем встряхивания в течение 10 мин. В результате получают маточный раствор адреналина (500 мкг/мл).
Для приготовления рабочего раствора адреналина из маточного пользуются следующей схемой:
|
Номер раствора с адреналином |
Физиологический(0,9%) раствор хлорида натрия |
Разведение маточного раствора |
Конечная концентрация при агрегометрии (0,45 мл плазмы + 0,05 мл раствора адреналина) |
|
1 |
4,9 мл + 0,1 мл маточн. раствора |
1:50 |
10 мкг/мл |
|
2 |
1,0 мл + 1,0 мл из раствора 1 |
1:100 |
5 мкг/мл |
|
3 |
1,0 мл + 1,0 мл из раствора 2 |
1:200 |
2,5 мкг/мл |
Запись агретограмм
проводят в соответствии с инструкцией к агрегометру. С помощью растворов адреналина разной концентрации получают запись кривых агрегации тромбоцитов. Наряду с кривыми агрегации на экране отображается количество тромбоцитов в исследуемой плазме. В норме количество тромбоцитов составляет 140 – 400*109/л